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一種單增李斯特菌的分離方法

2018-09-12 10:15來源:締一生物


涉及食品安全的一個主要因素是由致病性微生物引起的食源性疾病。在各地發生的一系列食源性疾病中,單核細胞增生性李斯特菌占著主要的地位。單核細胞增生性李斯特菌簡稱為單增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM),是李斯特菌屬(Listeria)中**能引起人畜共患病的食源性病原菌,是食品中四大病原菌之一。1988年,WHO發表了“食源性李斯特菌病”勸告書,指導世界各國如何預防的污染和中毒,勸告各公共衛生機構加強監測的力度,同時也將其列為食源性病菌重點檢測的對象之一。目前,雖然我國沒有發生大規模爆發流行,但卻有大量關于食品被單增李斯特菌污染的報告,這同樣引起了人們的關注。


如何有效分離和鑒定出單增李斯特菌,成為食品安全的重要問題。我國關于食品中李斯特菌的檢驗根據我國食品安全國家標準GB 4798.30-2010,包括增菌、分離和鑒定 3 個環節。目前,分離環節常會采用顯色培養基,使其菌落顏色不同于其它干擾菌,實現快速分離。


HiMedia公司(國際知名微生物培養基生產商)生產的單增李斯特菌顯色培養基(HiCrome標識,貨號MV1540),該培養基是根據ottaviani 和 Agosti 開發的單核細胞增生李斯特氏菌鑒別基礎培養基,用于從食物和動物飼料中選擇性分離鑒別單核細胞增生李斯特氏菌,在這款李斯特氏菌顯色培養基在該培養基配方上略作改良,它在制備時用無瘋牛病風險的植物蛋白胨取代了動物蛋白胨。


培養基中的HiVeg蛋白胨1號、HiVeg水解物、酵母粉和丙酮酸鈉提供了細菌生長所必需的營養和氮源物質。葡萄糖是可發酵的碳水化合物。氯化鈉維持滲透壓平衡。磷酸鹽是緩沖液成分。氯化鋰和選擇性添加劑(FD212和FD213)抑制伴隨的菌群生長,而允許李斯特氏菌生長。李斯特氏菌水解顯色底物,產生綠色菌落。從其它李斯特氏菌中鑒別出單核細胞增生李斯特氏菌,是依據其特有的磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C(PIPLC)活性。磷脂酶C水解培養基中的底物添加劑(貨號    )導致單核細胞增生李斯特氏菌菌落周圍產生不透明的暈環。由于單核細胞增生李斯特氏菌和英諾克李斯特氏菌具有相似的生化特性,傳統培養基(PALCAM培養基)不能區分,使用該培養基可以有效區分開,且該培養基成分完全符合我國國家標準,HiMedia公司產品有國際認證的GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485等證書,優質品質,值得信賴。