解決細(xì)胞培養(yǎng)中污染少不了支原體祛除劑

在生物污染中，細(xì)菌污染更為常見。特點(diǎn)就是：發(fā)生迅速、容易觀察。一般發(fā)生細(xì)菌污染后幾天內(nèi)，就能肉眼觀察到；可肉眼觀察到培養(yǎng)物變渾濁，有時(shí)可觀察到明顯顆粒物，液體表面可能會(huì)形成一層薄膜。

真菌污染：

酵母菌、霉菌是真菌污染中常見的兩類。污染初期，培養(yǎng)基pH均不會(huì)有明顯變化，后期會(huì)伴隨pH的升高，培養(yǎng)物會(huì)變得混濁，顯微鏡下觀察，酵母菌污染會(huì)有橢球形或球形顆粒，而霉菌污染則能看到明顯菌絲。

支原體污染：

支原體非常小，光學(xué)顯微鏡下難以檢測，污染前期也很難看到明顯現(xiàn)象。當(dāng)支原體密度高到一定程度后，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)物“變質(zhì)”：pH驟變引起培養(yǎng)基快速變黃等。一些生長緩慢的支原體可在培養(yǎng)物中持續(xù)存活，而不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，但支原體污染的細(xì)胞，通常行為和代謝都會(huì)發(fā)生改變，進(jìn)而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

病毒污染：

病毒可以利用宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)進(jìn)行繁殖。體積小，檢測及祛除的難度都比較大。雖然大多數(shù)病毒對(duì)宿主的要求都比較嚴(yán)格，通常不會(huì)對(duì)宿主以外物種及細(xì)胞培養(yǎng)物產(chǎn)生不良影響，但對(duì)被病毒感染的細(xì)胞本身會(huì)產(chǎn)生比較大的威脅。因此，實(shí)驗(yàn)時(shí)，要選擇來源正規(guī)的細(xì)胞株，實(shí)驗(yàn)操作過程中，也要注意無菌操作，預(yù)防污染。

細(xì)胞交叉污染：

不同細(xì)胞共同培養(yǎng)在一個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)，就會(huì)形成交叉污染。需要通過合格的細(xì)胞購買渠道，以及嚴(yán)格規(guī)范的操作流程規(guī)避該問題。

因此，在挑選試劑時(shí)，要購買在正規(guī)產(chǎn)品，盡量使用一次性滅菌器具，注意實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范。創(chuàng)造無菌培養(yǎng)環(huán)境細(xì)胞一旦發(fā)生污染，多數(shù)情況下都不可再繼續(xù)使用，即便是使用祛除試劑，也會(huì)造成不可避免的經(jīng)濟(jì)成本和時(shí)間成本。