挑選胎牛血清為什么要對內毒素特別關注？- 威正翔禹

有些同學經常看締一生物文章會發現經常說在選購血清的時候，一定要關注血清的“內毒素指標”，這是為什么呢？挑選胎牛血清的時候為什么要對內毒素特別關注呢？本篇文章締一生物小助手就跟大家詳細說說。

內毒素含量也是劃分血清等級的標準之一，內毒素含量越低的血清，級別就越高，以胎牛血清為例：

當血清中內毒素含量≤10EU/ml時，此血清為特級胎牛血清；

當血清中內毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時，此血清為優級胎牛血清；

當血清中內毒素含量≥ 25EU/ml時，此血清為標準級胎牛血清。

(目前，由于同一廠家，不同批次的血清，內毒素數值也可能有較大差異，因此很多血清廠家在名稱上已不注明級別。但使用者仍可通過檢測報告，自行甄別挑選。)

　　那這血清中內毒素的高低對細胞培養會有啥影響啊？為什么選血清要選內毒素含量低的呢？

　　所以今天我們就來聊聊，細胞培養中血清的內毒素問題。

1、人體對細菌內毒素極為敏感

　　極微量（1-5ng/kg，而1ng≈2.5EU）內毒素就能引起體溫上升，發熱反應持續約4小時后逐漸消退。

　　自然感染時，因革蘭氏陰性菌不斷生長繁殖，同時伴有陸續死亡、釋出內毒素，故發熱反應將持續至體內病原菌完全消滅為止。

　　內毒素引起發熱反應的原因是內毒素作用于體內的巨噬細胞、中性粒細胞等，使之產生IL-1、IL-6和TNF-α等細胞因子，這些細胞因子作用于宿主下丘腦的體溫調節中樞，促使體溫升高發熱。

　　由于內毒素是細菌死亡裂解或自溶引起的，因此環境中大量存在內毒素。但是如果在細胞培養過程中，出現了大量內毒素，而細胞要用于某些疾病的治療，回輸人體，這是萬萬不行的。

2、內毒素對細胞培養的影響

　　細胞遺傳代謝的影響

　　此前，有人做過實驗，來觀察內毒素對細胞培養的影響，記錄的影響包括：刺激白細胞培養物產生組織因子、激活鼠巨噬細胞，以及通過極低水平（低于1 ng/mL）的內毒素抑制鼠類紅細胞集落形成等一系列指標。

　　隨后，發表了許多關于內毒素對體外細胞功能和生長影響的論文。

Morris等人發現（1），只需暴露 6 小時，低至 0.5 ng/mL 的內毒素水平可以增加馬腹膜巨噬細胞中IL-6的產生。Mattern等人發現（2）， 100 ng/mL 內毒素可以刺激人類 T 細胞的增殖及其淋巴因子的產生，但這種刺激需要與先前暴露于內毒素的單核細胞直接物理接觸。Sibley等人報道，10 到 200 ng/mL 內毒素刺激鼠 B 細胞腫瘤細胞系 (70Z/3) 完成 IgM 的產生，然后在細胞表面表達（3）。

　　從現有的研究可以看出，內毒素對于細胞培養影響還是很大的：

　　改變細胞外形

　　活化細胞，產生訊息傳遞物質

　　抑制酶活性

　　抑制人工受精的成功率等

　　血清中內毒素含量過高，更容易導致細胞“亞健康”，造成數據不準，或細胞狀態不良、老化、甚至死亡，導致試驗中斷失敗。所以要盡量選擇內毒素低的血清。

　　對實驗結果的影響

　　內毒素會加速細胞衰老、凋亡，細胞提前死亡，影響實驗結果，導致實驗數據產生波動。

　　參考文獻：

1.Morris,D.D., Crowe, N., Moore, J.N.and Moldawer, L.L. Endotoxin-Induced Production ofInterleukin 6 by Equine Peritoneal Macrophages In Vitro. Am. J. Vet. Res.53:1298-1301 (1992).

2.Mattern, T.,Thanhauser, A., Reiling, N.,Toellner, K., Duchrow, M., Kusumoto, S.,Rietschel,E.T., Ernst, M., Brade, H.,Flad, H.D. and Ulmer, A.J. Endotoxin and Lipid A StimulateProliferation of Human T Cells In the Presence of Autologous Monocytes. J.Immunol. 153:2996-3004(1994).

3.Sibley, C.H.,Terry, A. and Raetz, C.R.H.Induction of K Light Chain Synthesis in 70Z/3 BLymphoma Cells by Chemically Defined Lipid A Precursors. J. Biol. Chem.263:5098-5103 (1988).

3、選擇內毒素低的優質血清

　　一般來說，細胞或組織培養過程中內毒素污染源通常來自于血清、培養液及外加藥物配制用水等。

　　所以選擇內毒素含量低的優質血清就顯得尤為重要。締一生物是Ausbian血清國內總代理，進口的澳洲血清，助力國內細胞培養！了解更多Ausbian血清，歡迎訪問締一生物官網：http://www.dyshengwu.com/?。